斑馬魚轉(zhuǎn)基因(斑馬魚轉(zhuǎn)基因家系)
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今天給各位分享斑馬魚轉(zhuǎn)基因的知識,其中也會對斑馬魚轉(zhuǎn)基因家系進(jìn)行解釋,如果能碰巧解決你現(xiàn)在面臨的問題,別忘了關(guān)注祥龍魚場哦,現(xiàn)在開始吧!
今天給各位分享斑馬魚轉(zhuǎn)基因的知識,其中也會對斑馬魚轉(zhuǎn)基因家系進(jìn)行解釋,如果能碰巧解決你現(xiàn)在面臨的問題,別忘了關(guān)注祥龍魚場哦,現(xiàn)在開始吧!
本文目錄一覽:
- 1、你好,我想問問關(guān)于斑馬魚轉(zhuǎn)基因的一般試驗方法。我是對轉(zhuǎn)基因沒有一點兒基礎(chǔ)的人。
- 2、斑馬魚轉(zhuǎn)基因載體?是否需要轉(zhuǎn)染細(xì)胞檢測載體正常表達(dá)
- 3、斑馬魚轉(zhuǎn)基因載體 是否需要轉(zhuǎn)染細(xì)胞檢測載體正常表達(dá)
- 4、紅斑馬魚和藍(lán)斑馬魚有何不同?紅斑是轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)物嗎?
- 5、斑馬魚是很多人的第一個轉(zhuǎn)基因?qū)櫸?/a>
你好,我想問問關(guān)于斑馬魚轉(zhuǎn)基因的一般試驗方法。我是對轉(zhuǎn)基因沒有一點兒基礎(chǔ)的人。
序列到NCBI上去查,物種選Zebrafish或Danio rerio。
將目的基因與質(zhì)粒載體構(gòu)建重組質(zhì)粒,最好再接個報告基因,比如EGFP。
和I-SceI(大范圍核酸轉(zhuǎn)移酶)一起共顯微注射到單細(xì)胞期階段斑馬魚胚胎中(產(chǎn)后30分鐘),溶液配方
質(zhì)粒 0.5-1μl
I-SceI Buffer(10×) 1μl
I-SceI enzyme(5u/μl) 1μl
dd H20 補(bǔ)足10μl
質(zhì)粒終濃度 50-100ng/μl,注射量2nl/per。
斑馬魚轉(zhuǎn)基因載體?是否需要轉(zhuǎn)染細(xì)胞檢測載體正常表達(dá)
最好做下細(xì)胞轉(zhuǎn)染,看看你用的報告基因表達(dá)沒有,一般會在載體里面加一段gfp之類的基因。這樣的話轉(zhuǎn)基因魚可以在熒光顯微鏡下觀察,以便于篩選成功的胚胎。不過你也可以同時做,即轉(zhuǎn)染細(xì)胞同時注射胚胎,這樣出了問題可以直接分析。有一些細(xì)胞內(nèi)可以表達(dá)的注射后就不表達(dá)了,也遇到過這種情況。
斑馬魚轉(zhuǎn)基因載體 是否需要轉(zhuǎn)染細(xì)胞檢測載體正常表達(dá)
最好做下細(xì)胞轉(zhuǎn)染,看看你用的報告基因表達(dá)沒有,一般會在載體里面加一段gfp之類的基因。這樣的話轉(zhuǎn)基因魚可以在熒光顯微鏡下觀察,以便于篩選成功的胚胎。不過你也可以同時做,即轉(zhuǎn)染細(xì)胞同時注射胚胎,這樣出了問題可以直接分析。有一些細(xì)胞內(nèi)可以表達(dá)的注射后就不表達(dá)了,也遇到過這種情況。
紅斑馬魚和藍(lán)斑馬魚有何不同?紅斑是轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)物嗎?
紅斑馬魚是最近幾年美國生命科學(xué)科學(xué)家的科研成果,主要是敲除了原來藍(lán)斑馬魚染色體內(nèi)某一個控制體色的堿基,從而造成其體色的改變。目前該魚對人類體色的研究有重大的意義。理論上說 紅斑馬魚屬于基因工程的產(chǎn)物,不應(yīng)該流入市場的,但可能是一些不法商人為謀取利潤而導(dǎo)致其出現(xiàn)在市場上。 不建議用紅斑馬魚和藍(lán)斑馬魚雜交,本人嘗試過其體色很難看,且成活率比純種的低。